Серологические исследования: что это такое, методы диагностики, процесс сдачи, расшифровка результатов
Каждый из нас на протяжении своей жизни хотя бы раз сталкивался с инфекционными заболеваниями. Все они вызываются большим количеством патогенных агентов: бактериями, вирусами, простейшими и грибами. Микробиология насчитывает миллионы микроорганизмов, способных привести к развитию инфекции у человека.
Что такое серологический анализ
Серологические реакции являются важным инструментом для выявления причины инфекционного заболевания. Серодиагностика — специфический анализ крови, который основан на взаимодействии антигенов и антител в сыворотке.
Антитела представляют собой белковые молекулы, образующиеся в организме человека через несколько дней после контакта с патогеном. Они являются строго специфичными для каждой инфекции и вырабатываются для уничтожения возбудителя. Распознавание этих белковых фракций позволяет быстро выявить и микроорганизм, к которому они образовались. Антигены же представляют собой чужеродные белки, содержащиеся в бактериях. Синтезированное антитело находит в крови антиген и прочно связывается с ним, не позволяя ему губительно влиять на организм.
Реакция связывания этих двух белков с образованием единого комплекса лежит в основе применения всех серологических реакций. Для поиска антител используются особые стандартные растворы с антигенами возбудителей (диагностикумы), которые добавляют к исследуемой крови. Серодиагностика определяет все белковые маркеры инфекций, а последующая расшифровка результатов дает информацию еще и о продолжительности заболевания. Эта особенность характерна только для серологического анализа, что делает его методом выбора во многих клинических ситуациях.
Преимущества и недостатки
Серологический метод лабораторной диагностики имеет большое количество плюсов, что глубоко внедрило его в практическое использование во всех отраслях медицины: гинекологию, урологию, инфектологию и венерологию.
Серодиагностика является общедоступным анализом, позволяющим быстро получить точные результаты. Она не требует длительной подготовки к забору материала и легко переносится всеми пациентами. Для забора венозной крови от пациента требуется соблюдать диету лишь в течение 48 часов. Серологические реакции также обладают высокой специфичностью (100%), чувствительностью (95%) и точностью (90-95%).
Но этот анализ венозной крови требует больших затрат дорогих диагностикумов, что влияет и на его себестоимость. Некоторые возбудители обладают слабой иммуногенностью, то есть в организме к ним вырабатывается мало антител, поэтому проведение серодиагностики невозможно. Кроме того, метод значительно реже используется при вирусных инфекционных патологиях, уступая по эффективности ПЦР-анализу.
В каких случаях назначают
Серологическое лабораторное исследование крови назначают для диагностики инфекционных заболеваний: бактериальных, вирусных, протозойных, паразитарных и микст-инфекций. Наиболее широко выявление антител используется в акушерско-гинекологической и урологической практике. В урологии это лабораторное исследование используется при уретритах неясной этиологии, баланитах и баланопоститах. В гинекологии направляют на обследование при любом воспалительном процессе репродуктивной системы (вульвовагиниты, кольпиты, цервициты и эндометриты).
В акушерстве каждой беременной женщине назначают анализ венозной крови с целью исключения заболеваний, опасных для плода. Эти инфекции носят название «TORCH-комплекс» и определяются с помощью серологических реакций. ТОРЧ-инфекции вызывают у развивающегося плода пороки развития, часто несовместимые с жизнью. Именно поэтому ранняя и точная диагностика этих инфекций является основной целью акушера-гинеколога. Серология проводится и при подозрении на мужское или женское бесплодие по причине инфекционной патологии.
Если врач подозревает у пациента наличие инфекции, передающейся половым путем, то требуется прохождение комплексного обследования, включающего серодиагностику. Если у одного из партнеров найдено заболевание из группы ИППП, то второму партнеру необходимо пройти исследование, даже если у него нет клинических симптомов.
Методы диагностики
Чаще всего в лабораториях серологическая диагностика представлена следующими иммунохимическими серореакциями:
- реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
- иммуноферментный анализ (ИФА);
- реакция непрямой гемагглютинации (РНГА);
- реакция связывания комплемента (РСК).
Эти виды исследования относятся к сложным серореакциям и обладают значительными преимуществами перед остальными. Они проводятся крайне быстро, имеют высокую точность диагностики болезней и не требуют длительной подготовки: от пациента требуется только сдать анализ венозной крови.
Иммунофлюоресцентная реакция РИФ
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), или анализ Кунса – метод экспресс-обнаружения антигенов патогенного агента в биоматериале пациента. Для проведения РИФ используется специальный краситель – флюорохром, способный светиться под люминесцентным микробиологическим микроскопом. Флюорохром добавляют в диагностическую сыворотку со строгим соблюдением концентрации, иначе реакция может показать ложные результаты. Иммунофлюоресцентная реакция бывает двух видов: прямая и непрямая.
Прямая реакция Кунса выявляет только антигены возбудителя. Для их определения в биоматериал добавляют диагностическую сыворотку, состоящую из антител и флюорохрома. Антигены, находящиеся на клеточной стенке возбудителя, связываются с окрашенными антителами. Врач лабораторной реакции рассматривает предметное стекло под микроскопом и видит ярко-зеленое свечение. Типичным примером такой реакции является выявление хламидий, контрастированных синькой Эванса.
Непрямая РИФ (РНИФ) определяет антигенно-антительные комплексы. Для этого врач последовательно добавляет в образец сначала немеченые иммуноглобулины, чтобы они связались с антигенами. Затем к образованным иммунным комплексам добавляется новая сыворотка, содержащая уже меченные красителем антитела к недавно образовавшимся комплексам. Наиболее часто прямая реакция используется для диагностики вирусных болезней.
Единственным недостатком данных реакций является некоторая степень субъективизма при учете результатов: одна и та же интенсивность свечения иногда расценивается врачами по-разному, что в итоге приводит к ложным данным лабораторного обследования.
Реакция непрямой гемагглютинации РНГА
Для проведения исследования используются красные клетки крови – эритроциты, на поверхности которых расположены антигены или антитела. Сыворотка носит название антигенного или антительного эритроцитарного диагностикума. Диагностикум добавляют к исследуемой крови, затем наблюдают за реакцией. При присоединении этих эритроцитов к антигенам или иммуноглобулином крови образуются комплексы, а красные кровяные клетки начинают выпадать в осадок. При отрицательном анализе эритроциты скапливаются в виде небольшого пятна в виде пуговицы. Если же на дне пробирки или планшетки образовался осадок с фестончатыми краями в виде зонтика, то реакция считается положительной.
Сложность в проведении этого серологического теста заключается в необходимости точного приготовления эритроцитарного диагностикума и строгого соблюдения концентраций используемых компонентов.
Иммуноферментный анализ ИФА
Метод иммуноферментного анализа считается самой точной, специфичной и чувствительной серореакцией. Учет результатов ИФА автоматизирован, а человеческий фактор и субъективная оценка данных исключена. Точность результата достигает 98%, а при повторном исследовании – 100%. ИФА используется для диагностики инфекций, передающихся половым путем, ВИЧ, вирусных гепатитов A, B, C, D, E, TORCH-инфекций и множества других заболеваний.
Существует более десяти модификаций данного анализа (прямой, непрямой, неконкурентный, твердофазный и т. д.), но все они имеют особые, характерные особенности диагностики, но схожий принцип проведения. Фазы иммуноферментных серологических реакций включают в себя создание комплекса антиген-антитело, к которому добавляют ферменты, играющие роль метки. Затем исследуемый материал располагают на специальный планшет, помещают в автоматизированную систему и начинают поиск комплексов, меченых радионуклидами. Анализатор выявляет святящиеся метки, измеряет оптическую плотность и степень свечения иммунных клеток, а затем выдает результат анализа.
Как подготовиться к сдаче
От пациента требуется строго соблюдать ряд простых правил:
- за 72 часа до манипуляции следует соблюдать диету: нельзя употреблять в пищу жирное, жареное, соленое и острое, алкогольные напитки также запрещены;
- рекомендуется поддерживать оптимальный водный баланс в организме, а для этого необходимо пить не менее двух литров чистой питьевой воды;
- анализ венозной крови проводится на голодный желудок, поэтому минимум за 10 часов до манипуляции нельзя есть, пить чай, кофе и другие напитки;
- за 4 часа до процедуры запрещается курить.
Если по состоянию здоровья пациент обязан пить какие-либо таблетки, необходимо заранее предупредить об этом лечащего врача. За час до сдачи материала рекомендуется избегать физических нагрузок, а перед тем, как зайти в процедурный кабинет, следует присесть и отдохнуть 10-15 минут.
Процесс сдачи анализа
Забор венозной крови на серологическое исследование осуществляется в первой половине дня. Пациенту следует заблаговременно приехать в лабораторию, взяв с собой необходимые документы (паспорт и направление на анализ).
Пациенту предлагают пройти в процедурный кабинет и удобно расположиться на кресле. Взятие крови осуществляют из вены, которая находится в области локтевого сгиба, поэтому необходимо освободить предплечье и локтевую зону от вещей. На плечо накладывается жгут, а под руку подкладывают подушку. Медицинская сестра надевает одноразовые стерильные перчатки и обрабатывает место пункции ватным тампоном, смоченным в дезинфицирующем средстве.
Алгоритм проведения венозной инъекции включает в себя нагнетание крови в вену, для этого пациента просят несколько раз сжать и разжать кулак. Сосуд при этом лучше визуализируется и прощупывается, что облегчает забор материала. Затем медсестра вводит иглу шприца в вену, берет 10 миллилитров крови и наклеивает на место инъекции бактерицидный пластырь. Чтобы избежать образование гематомы, после манипуляции следует согнуть руку в локте на 15-20 минут.
Расшифровка результатов
Для правильной постановки диагноза серологические реакции должны расшифровываться квалифицированным специалистом. Выявление антител еще не говорит о наличии заболевания, в некоторых случаях циркуляция иммуноглобулинов в крови — это норма. Так, в нашем организме постоянно присутствуют антитела IgM от кори, ветряной оспы и т.д. Они являются маркером перенесенной инфекции и защищают нас от повторного инфицирования. Поэтому учет результатов анализа крови и расшифровка серологического исследования должны проводиться индивидуально для каждого пациента.
- Выявление в крови иммуноглобулинов класса A к вирусу или бактерии свидетельствует об остром инфекционном процессе, длящемся не более 14-ти дней.
- Если в крови найдены иммуноглобулины класса M, то требуется расширенная лабораторная диагностика, потому что эти антитела – маркер как уже перенесенной болезни, так и длительного инфицирования.
- Нарастание титра антител в 4 и более раз в двух последовательно взятых анализах крови говорит о наличии инфекционного заболевания.
- Выявление любых антигенов патогена свидетельствует о том, что возбудитель присутствует в организме.
В случае неясной диагностической картины проводятся повторные серологические тесты или обследование дополняется другими методами исследования (ПЦР, бакпосев и т.д.)
Что делать при обнаружении венерических болезней
Если серологическая диагностика подтвердила наличие ИППП, то необходимо незамедлительно переходить к этапу лечения, чтобы избежать осложнений и хронизации процесса. Пациенту следует повторно записаться на консультацию к лечащему врачу. Он назначит этиотропное комплексное лечение и будет динамически наблюдать за состоянием пациента во время медикаментозной терапии.
Тайтл: Серологические исследования: что это такое, анализ крови на определение инфекций, как сдавать и расшифровать, методики реакций для определения заболеваний
Дескрипшен: Что такое серологические исследований и для выявления каких заболеваний они используются. Как проходит анализ крови на определение инфекция. Как подготовиться, сдавать и расшифровать результат после получения. Методики проведения реакций для определения заболевания.